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超低温保存法之病毒处理点击次数:124 发布时间:2019-11-01

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皇冠银河  CHAODIWENDELENGDONGBAOHUJIBUTONGYUDONGGANFASUOYONGDELENGDONGJI。ATCC CHANGYONGYIZHONGYOUGANYOU(10%)、ERJIAYAFENG(5%)HEPEIYANGYEZHICHENGDEHUNHEJIBAOCUNDUOSHUDEXIBAOZHU。ZHEIXIEHUAXUESHIJIJINRUXIBAONEIKEBIMIANNEIMODELENGDONGSUNSHANG。 ZHUCUNZAIDIWENRONGQINEIDEXIBAOFUSUSHIBIXUXIAOXINCAOZUO。DANGXIAOGUANBEIJIARESHI,SUOXINGCHENGDEBINGJINGHUIJIANGXIBAOSHASI,ZHENGQUECAOZUOJIUKEBIMIANZHEIZHONGSHIGU。ZHIYAOXUNSUJIANGYANGPINJIEDONGJIUNENGJIANSHAOHUOLIDEDIUSHI,ZUOFASHI:JIANGFENGKOUDEXIAOGUANXUNSUFANGRU37℃DESHUIZHONG,ZHIZHISUOYOUDEBINGRONGHUA,RANHOUDAKAIGUANKOU,JIANGNEIRONGWUYIRUPEIYANGJI。

  超低温保藏的微生物必须始终贮存在温度非常低的环境中,因此需要液氮罐。在长期贮存的过程中必须经常注意补充液氮。这种贮存方式比冻干法需要更多的经费,包括为了维持贮存温度所必要的劳动力和液氮等。
  2.2 材料
  病毒超低温保存所需材料有:热收缩塑料管(Nunc Cryoflex),液氮罐,防护手套和面罩,久性记号笔,气体喷灯,装液氮的保温瓶。
  2.3 方法
  (1)剪一段两端各超出冷冻管长度2cm 的热收缩塑料管。
  (2)将含有澄清病毒悬液(组织培养的上清培养基,或组织培养基内的细胞溶解产物均可)冰浴几分钟,用灭菌移液管将0.2ml 冰浴过的上清悬液分装到冷冻管内,并将盖子拧紧。
  (3)将有病毒的冷冻管放入热收缩塑料管中部,插入正确的标签。
皇冠银河  (4)用喷灯小心加热热收缩塑料管,并使之包住冷冻管。注意不要用太高的温度加热热收缩塑料管。

  (5)再小心加热热收缩塑料管的两端,用大号镊子夹紧管的端口至完全密封。
  (6)将密封好的冷冻管快速在装有液氮的保温瓶中冷冻(操作时要求戴面罩和手套)。
  (7)将冷冻过的冷冻管放入液氮罐中的格子内,同时记录样品的详细的存放位置、实验编号和存放日期等。
皇冠银河  (8)需要用时,迅速从液氮罐内取出所需样品,并投入37℃水浴箱中解冻后,用解剖刀片在冷冻管的硅化垫圈处切开热收缩塑料管。拧开冷冻管的盖子时不需要除去热收缩塑料管。

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